Page 26 - BUKU AJAR HIGH PERFORMANCE LIQUID CHROMATOGRAPHY (HPLC)

Buku Ajar High Performance Liquid Chromatography (HPLC)

pita karena ketidakseimbangan transfer massa yang
proporsional dengan kecepatan laju fase gerak.

Adapun penjelasan masing-masing faktor tersebut adalah
sebagai berikut:

Penyebab Pertama: Difusi Eddy
Difusi eddy disebabkan oleh packing kolom yang tidak
seragam, sehingga jalur yang dilalui analit berbeda dan
sampai di ujung kolom dalam waktu yang berbeda. Fase
gerak melewati dan mengangkut molekul sampel (Gambar
6). Beberapa molekul 'beruntung' dan meninggalkan kolom
terlebih dahulu dibanding yang lainnya, setelah melakukan
perjalanan secara kebetulan dalam garis lurus melalui
dasar kromatografi. Molekul sampel lainnya kemudian
pergi, setelah mengalami beberapa pengalihan di
sepanjang jalan.

Gambar 6. Difusi Eddy pada Kromatografi Kolom

Kecepatan rata-rata analit menentukan waktu retensinya.
Pelebaran pita disebabkan oleh kecepatan aliran yang
berbeda ketika melalui kolom. Peranan difusi Eddy
ditunjukkan pada persamaan :
....................................(12)

Dimana
H p : tinggi pelat yang setara dengan pelat teori, yang
disebabkan oleh keragaman dalam laju aliran melalui
kolom.
d p : garis tengah partikel
: tetapan yang harganya mendekati 1

20