Page 22 - Адууны халдварт цус багадах өвчний үүсгэгчийг илрүүлсэн дүн
P. 22
Адууны халдварт цус багадах өвчний үүсгэгчийг илрүүлсэн дүн
- Хошуунууд (10 мкл, 200 мкл , 1000 мкл)
- 1,5 микротюб
1. Бүлэгнүүлдэггүй хуруу шилэнд хийсэн цусаа дээшээ, доошоо зөөлөн
хөдөлгөж тарааж байгаад 1,5 микротюбенд 300 мкл цус авна.
2. Cell lysis solution 900 мкл нэмээд гараараа дээш, доош сайн хөдөлгөж
сайтар хольж өрөөний температурт 10 минут байлгана.
3. Үүнийгээ 16000 эрг/мин 20 секунд центрфугдэн дээд шингэн хэсгийг
асгана.
4. Тунасан эсийг уустал нь хольж өгнө.
5. Nuclei lysis solution уусмал 300 мкл хийж, хольж өгнө.
6. Protein precipitation solution уусмал 100 мкл нэмж, 20 секунд хольж өгнө.
7. 16000 эрг/мин 3 минут центрифугдээд, дээд шингэн хэсгийг авч шинэ
тюбенд хийнэ.
8. Шинэ тюбенд хийсэн шингэн дээрээ 2-propanol-ийн уусмалаас 300 мкл
хийж, хольж өгнө.
9. 16000 эрг/мин 1 минутын турш центрифугдэнэ.
10. Шингэнийг асгаад 70% этанол 300 мкл хийж угаана. 16000 эрг/мин 1
минут центрифугдэн болгоомжтой этанолыг асгана.
11. Тюбнийхээ таглааг нь онгойлгон агаарын температурт 10-15 минут
хатаасны дараа 100 мкл DNA Rehydration Solution уусмал хийнэ.
0
12. 65 С-д 1 цаг байлгаж ПГУ тавихад бэлтгэнэ.
Г.Түвшинсайхан
22
