Page 139 - TOKSOPLASMOSIS-pada-Hewan
P. 139
yang masih sangat terbatas peralatannya sekalipun, dan berikut ini
merupakan protokol L-AMP yang dapat dipakai sebagai acuan.
- Buat L-AMP mix dengan mencampurkan (1.5µl MgSo4 +
3.5µl dNTP + 2.5 µl Buffer bst Thermopol)
- Masukkan 7.5 µl L-AMP mix kedalam tabung PCR
- Masukkan primer set (F3,B3, FIP, BIP, LF,LB) asing-
masing 1 µl
- Masukkan template DNA sebanyak 2 µl
- Tambahkan bst DNA polymerase sebanyak 1 µl
- Tambahkan ddH2O semapai volume 25 µl , atau sebanyak
8.5 µl
- Vortex selama 10 detik, kemudian spindown selama 1 menit
o
- Panaskan pada suhu 63 C selama (45-60 menit)
o
- Panaskan dalam suhu 80 C dalam 2 menit
- Teteskan 0.5 µl SBRY green I
- Visualisasi di atas UV transluminator
130 Toksoplasmosis pada Hewan