Page 137 - TOKSOPLASMOSIS-pada-Hewan

elektroforesis dengan menambahkan DNA staining seperti ethidium
bromide. Hasil positif akan terlihat adanya banyak pita DNA dengan
ukuran yang bervariasi.

Hasil amplifikasi juga dapat dilihat secara langsung dengan
menambahkan SYBR green I yang mempunyai kemampuan berikatan
dengan DNA, hasil positif akan terlihat warna hijau berpendar di bawah
sinar ultra violet., visualisasi hasil L-AMP dengan menambahkan
SYBR green I dapat dilihat pada Gambar 16.

Penambahan fluorescent detection reagent (FDR), seperti calcein
sebelum dilakukan amplifikasi juga dapat dilakukan, sehingga akan
dapat melihat hasil amplifikasi secara langsung di bawah ultra
violet (UV) illuminator segera sesudah amplifikasi dengan L-AMP

dan mengurangi kontaminasi. Calcein pada awalnya akan berikatan
dengan ion magnesium, hasil reaksi L-AMP akan menghasilkan ion
pyrophosphate yang akan berikatan dan memisahkan magnesium dari
calcein, sehingga akan terlihat berpendar di bawah UV.

Gambar 48. Visualisasi hasil L-AMP dengan menambahkan
SYBR green I; Hasil positif ditunjukkan sampel nomor 1-4
(berwarna hijau); hasil negative sampel nomor 5 (berwarna orange).

Hasil amplifikasi L-AMP, juga dapat dideteksi dengan melihat
kekeruhan reaksi sesudah amplifikasi menggunakan turbidimeter

128 Toksoplasmosis pada Hewan