Page 61 - MODUL ANALISIS MIKROBIOLOGI_Neat

1. Ekstrak tanah agar

Agar lunak (3 g/L) yang mengandung ekstrak tanah (1 kg tanah subur dalam 2
0
L air dan disterilkan selama 1 jam pada suhu 130 C kemudian disaring)
diinokulasi secara tusukan pada bagian tengah. Setelah terjadi pertumbuhan,
0
ditutup rapat dan disimpan pada suhu 4 C.
2. Agar miring dengan paraffin
Kultur ditumbuhkan pada agar miring yang mengandung pepton tetapi tanpa
gula. Setelah pertumbuhan terjadi, permukaannya ditutup paraffin steril
untuk mencegah penguapan dan membatasi penggunaan oksigen. Kultur
0
juga disimpan pada suhu rendah (4 C dalam ruang pendingin)
3. Deep Freezing
Saat kultur didinginkan, beberapa sel mati. Selama penyimpanan dalam

keadaan dingin sebagian sel akan tahan dan lainnya akan mati meskipun laju
kematian berkurang dengan rendahnya suhu pendinginan.
4. Liofilisasi (kering beku)
Sel-sel mikroba disuspensikan pada medium pembawa (suspending medium)
untuk melindungi sel. Hasil liofilisasi ini berupa tepung yang terdiri atas sel
mikroba yang liofilik, sangat mudah mengikat air. Contohnya kultur Yersenia
pestis yang diliofilisasi pada keadaan hampa dalam ampul gelas pada suhu
0
4 C selama 25 tahun, lebih dari 25% sel maih hidup.
5. Kultur tanah
Teknik ini digunakan untuk mikroba pembentuk spora seperti Penicillium,
Aspergillus, Bacillus, dan Streptomyces. Campuran tanah (20%), pasir (78%)
dan kalsium karbonat (2%), beberapa gram dimasukan dalam tabung dan
0
disterilisasi selama 8-15 jam pada suhu 130 C. setelah dingin, sejumlah
suspense spora ditambahkan, kelebihan air diuapkan dalam desikator pada
keadaan hampa dan tabung ditutup. Dengan cara ini, spora dapat bertahan
beberapa tahun tanpa berkecambah.
6. Dehidrasi dengan silica gel anhidrat
Tabung diisi setengahnya dengan silica gel dan disterilisasi kering pada suhu
0
175 C selama 1,5 hingga 2 jam. Suspensi (0,5 mL) yang telah didinginkan
terlebih dahulu diteteskan pada setiap tabung yang berisi silica gel,
0
didinginkan pada suhu 0 C selama 10-15 menit, lalu disimpan selama 1
minggu dalam desikator yang menggunakan silica ge aktif, sebelum dilakukan
uji viabilitas. Masing-masing tabung kemudian di tutup dengan Parafilm dan
0
0
disimpan dalam wadah tertutup pada suhu 2 - 4 C.

60