Page 19 - Buku Ajar High Performance Liquid Chromatography (HPLC)

Buku Ajar High Performance Liquid Chromatography (HPLC)

Dengan demikian, komponen sampel telah keluar dari
kolom dan dalam keadaan terpisahkan.

d. Waktu Retensi dan Volatilitas Relatif

Waktu retensi adalah waktu yang dibutuhkan oleh analit
untuk bergerak melalui kolom menuju detektor. Waktu
retensi diukur berdasarkan waktu dimana sampel
diinjeksikan sampai sampel menunjukkan ketinggian
puncak maksimum pada grafik dari senyawa itu.

Waktu retensi analit yang tertahan pada fase diam
dinyatakan dengan t R, sedangkan waktu retensi analit yang
tidak tertahan pada fase diam atau sering disebut sebagai
waktu retensi pelarut pengelusi dinyatakan sebagai t o atau
t M.

Gambar 5. Perhitungan waktu retensi kromatogram; t o
adalah waktu retensi pelarut pengelusi, t R1 & t R2 adalah
waktu retensi analit 1 dan analit 2

Waktu retensi analit dikurangi dengan waktu retensi pelarut
pengelusi atau pelarut pengelusi campur disebut sebagai
waktu retensi terkoreksi yang dinyatakan sebagai t R’.

........................................(4)

Waktu retensi yang dinyatakan dalam satuan (menit)
memberikan arti yang sangat penting dalam analisa
kualitatif dengan HPLC.
Pada dasarnya waktu retensi menunjukkan lama dari
sebuah komponen berada dalam kesetimbangan fase diam

15