Page 125 - Traité de Chimie Thérapeutique 2 : Médicaments Antibiotiques

3. LES CÉPHALOSPORINES 115

L'intermédiaire biosynthétlque, qui a été isolé, est un tripeptide
6-(L-a-aminoadipoyl}-L-cystéinyl-D-valine. Additionné à des extraits de protoplastes
de Cephalosporium acremonium, il est incorporé dans la chaîne métabolique et
conduit à la pénicilline N et à la céphalosporine C.
La pénicilline N serait convertie en céphalosporine C en présence d'une oxy-
génase.
Il est important de noter que, contrairement aux Penicillium, Cephalosporium
acremonium est dépourvu de systèmes enzymatiques tels que :
des transacylases : ceci revient à dire que les acides acétiques monosubsti-
tués éventuellement ajoutés au milieu ne seront pas incorporés par le cham-
pignon;
des amidases : on ne peut donc espérer en modifiant les conditions de cul-
ture orienter la fermentation vers la formation de 7-ACA.
En conclusion, la culture de Cephalosporium ne peut conduire qu'à une seule
céphalosporine.
b) Conditions de culture
La culture exige un milieu nutritif approprié, aéré et stérile, une température
et un temps de fermentation convenables.

Les bouillons de culture ne sont pas aussi riches en antibiotique que ceux de
Penicillium. En effet, le champignon secrète d'autres molécules dont la pénicil-
line N et la «céphalosporine P» de structure stéroidique, qu'il importe de séparer
de la céphalosporine C au cours des opérations extractives.

• Obtention du 7-ACA
C'est une étape capitale. La préparation des céphalosporines hémisynthétiques
n'a été possible qu'en 1962, date à laquelle a été obtenu dans de bonnes condi-
tions le 7-ACA.
En effet, des amidases capables de scinder en 7 la chaine 6-aminoadipoyle
ne sont pas connues, et l'hydrolyse chimique de la céphalosporine C ne conduit
qu'à de très faibles quantités de 7-ACA.
Les méthodes classiques de désacylation manquent de régiosélectivité et tou-
chent à la fois l'amide en 7 et l'azétidin-2-one. R.B. MORIN et Coll., en 1962, pro-
posent une méthode suffisamment sélective pour hydrolyser l'amide extracyclique
en épargnant le cycle B-lactame. Par la suite, d'autres procédés ont été décrits,
permettant d'augmenter sensiblement les rendements.
A titre d'exemples, nous citerons deux procédés.
a) Procédé MORIN
Son principe consiste à transformer la fonction amide en 7 en iminoéther, très
sensible à l'hydrolyse.
Le chlorure de nitrosyle dans l'acide formique conduit à un sel de diazonium
instable qui se cyclise en une iminolactone, très sensible à l'action de l'eau.