Page 23 - Revue des enils N°3_impr
P. 23

LES COAGULANTS







          les métHodes d’analyses des coagulants



                                                                              Philippe TROSSAT, ACTALIA



             Il existe plusieurs méthodes de mesure   dialyse ou filtration sur gel).  2)  coagulaNts  D’origiNe
             de l’activité  coagulante  des  enzymes   Celle-ci est déterminée sur un substrat
             utilisées en transformation fromagère.   à pH 6,5 et à 32 °C, soit pour une   FermeNtaire  iso  11815  l
                                               expression  en mg d’enzyme  active  /   Fil 157
             Les méthodes normalisées disponibles   litre à l’aide d’un lait étalon* (selon les
             sont spécifiques du type de coagulant   dispositions de la norme
             et correspondent «  in  fine  » à une   ISO 15163 l FIL 110) , ou soit pour   L’analyse de l’activité de la chymosine
             mesure de coagulation réalisée sur un   une expression en IMCU chymosine et   d’origine fermentaire est réalisé via la
             substrat défini (poudre de lait) à pH 6,5   IMCU pepsine  selon  les  dispositions   mesure d’activité totale de coagulation
             et à une température de 32 °C.    de la norme ISO 11815 l FIL 157    conformément  à la norme ISO 11815
                                               à l’aide d’étalons chymosine et pepsine   l  FIL 157 par comparaison avec un
             Cette mesure d’activité coagulante est   (valeur de référence d’environ 1000   étalon « chymosine » à environ 1000
             définie  dans  un  document  normatif   IMCU/g).                     IMCU / g.
             spécifique, la norme :
                                               À noter qu’une valeur IMCU « globale »   Le résultat  obtenu  est exprimé  en
             ISO 11815 l FIL 157.              représentant une activité  totale de   IMCU/g ou / ml.
                                               coagulation  peut être calculée par
             L’expression de cette activité peut être   sommation des activités individuelles.  La reproductibilité de cette méthode,
             différente selon le type de coagulants                               exprimée en CV,R % [(SR/moyenne du
             (et les documents normatifs associés) :   La reproductibilité de cette méthode,   taux) x 100] est de 3.5 %.
             mg / litre d’enzyme active  ; unité   exprimée  en CV,R % [(SR/moyenne
             internationale  de coagulation  : IMCU   du taux) x 100] est de 6.9 % pour la
             (International Milk Clotting Unit) par ml   chymosine et 12 % pour la pepsine.
             ou par g.
                                               Parallèlement,  à cette  méthode le  3) coagulaNts microbieNs

             Suivant les types de coagulants,   Journal  Officiel  de  la  République   iso 15174 l Fil 176
             les méthodes disponibles  sont les   Française de 1981 (JORF) décrit une
             suivantes :                       méthode  française  basée  sur  une
                                               version antérieure de la norme FIL 110   L’analyse  de l’activité coagulante des
                                               (FIL 110 A vs FIL 110 C en vigueur) qui   coagulants  microbiens  est réalisée
             1)  présure  De  veau  et         se différencie de la méthode en vigueur   selon  les dispositions  de la norme

             coagulaNt  issu  De  boviNs       par le pH du substrat (6,3 vs 6,5 sur la   ISO 15174  l  FIL 176 en utilisant
                                               version en vigueur) et la température de
             aDultes : méthoDe iso l           mesure (30 °C vs 32°C sur la version en   sur un substrat à pH 6,5 à 32 °C par
                                                                                  comparaison  avec une poudre étalon
             15163 Fil 110                     vigueur) et par une expression unique   de référence de coagulant microbien
                                               en mg d’enzyme active (chymosine ou
                                               pepsine) / litre.                  (Rhizomucor miehei).
             L’activité coagulante des deux enzymes                               Le résultat  obtenu  est exprimé  en
             constituant  la présure (chymosine et   *Le  lait  étalon  est actuellement  dispo-  IMCU/g ou / ml. La reproductibilité de
             pepsine)  est  déterminée  après une   nible pour une mesure à pH 6,3 et à une   cette méthode, exprimée en CV,R %
             séparation chromatographique des   température de 30 °C uniquement.  [(SR/moyenne du taux) x 100] est  de
             deux  enzymes  (gel  filtration)  sur  la                            5.6 %.
             présure ayant subi un dessalage (par







        REVUE DES ENIL N° 347 / 12 - 2017                                                                      21



     Revue des ENIL.indd   23                                                                                  19/12/2017   15:36
   18   19   20   21   22   23   24   25   26   27   28