Page 30 - Бог малын сохор догол өвчнийг оношлох ФХЭБУ-ын эсрэгтөрөгч бэлтгэн сорьсон дүн

Бог малын сохор догол өвчнийг оношлох ФХЭБУ-ын эсрэгтөрөгч бэлтгэн сорьсон дүн

 Бланкаар ПГУ-ын dH 2O 2мкл-ыг авав.
 Дээжийг 2µl –ээр аваад машины хэмжигч нүхэнд дээжээ хийгээд Мeasure

дарна.(230/280nm-д)
7 дугаар хүснэгт. Mastermix (Урвалынхолимог)

№ Урвалж Хэмжээ
1 Big dye Terminator v.3.2 3.2 мкл

2 Template DNA (20ng/µl) 1 мкл

3 5x Sequence buffer
4 Primer R and F (10 M) 25.6 мкл

5 ddH 2O 0 мкл
total volume

1 дээжинд 9 мкл холимог байхаар тооцон хуваан хийгээд дээрээс нь 1 мкл
ДНХ нэмнэ.

ДНХ олшруулах машинд хийв.
Программыг доорх байдлаар тохируулна.

8 дугаар хүснэгт. Дулаан солилцох үечлэл

№ Дулааны хэм Хугацаа Давтамж
1 96°C - 1ґ

2 96°C - 10ґґ

3 50°C - 5ґґ 25 cycle

4 60°C - 4ґґ

I. Spin column бэлтгэх
a. Column –г 3500 эрг/мин –ээр 2ґ хурилдуулав. Доод цодонд байгаа усыг асгаад

ахин дээрхийн адил хурдаар 2 удаа эргүүлж буферээс нь салгав.

b. Column (buffer-ийг авсан гель дээр) дээр 800 мкл ионгүйжүүлсэн ус хийж 3500
rpm- д 2 минут центрфугдээд доод цодонгийн усыг асгах замаар 3 удаа дахин

центрфугдэв. (усаар угаах шат)

Column дахь гелийг сүүлчийн угаалтын дараа гель ямар ч шингэнгүй
болсон дундаа хонхорхой үүсгэсэн байв. Түүнд IV-ээс гарч ирсэн дээжийг хийж

гельд шингэнийг шингээсэний дараа (шинэ цодонд авна) үүнийг ДНХ-ийн

Гомбосүрэнгийн Өлзийсайхан 27