Page 29 - Бог малын сохор догол өвчнийг оношлох ФХЭБУ-ын эсрэгтөрөгч бэлтгэн сорьсон дүн
P. 29

Бог малын сохор догол өвчнийг оношлох ФХЭБУ-ын эсрэгтөрөгч бэлтгэн сорьсон дүн



                                 5 дугаар хүснэгт.  M. agalactiea -г илрүүлэх ПГУ-ын холимог
                                ДМАЭМБ-аас            1 дээжний                                     1 дээжний
                      д/д      зөвлөсөн ПГУ          эзэлхүүнд        д/       multiplex ПГУ       эзэлхүүнд
                                                                      д

                       1.       ПГУ-н буфер           10 мМоль        1.        ПГУ-н буфер         10 мМоль
                       2.          MgCL 2             1.5 мМоль       2.           MgCL 2            2  мМоль
                       3.           KCL               50 мМоль        3.           dNTP             100 мМоль
                       4.           dNTP               1 мМоль                   Праймер            Тус бүрээс
                                                                      4.   MA-1, MA-2, CL-1, CL-      0.1 мкл

                                                                                     2
                                  Праймер
                            MAGAUVRC1-L               Тус бүрээс      5.      Taqполимераза          2.5 нэгж
                       5.   MAGAUVRC1-R             20 пико-Моль
                               Taqполимераза         1.25 мМоль       6.         ПГУ-ын ус         шаардагдах
                       6.                               /нэгж                                      хэмжээгээр
                       7.        ПГУ-ын ус           шаардагдах

                                                     хэмжээгээр       7.          Эх ДНХ              5 мкл
                       8.          Эх ДНХ               1 мкл         8.
                           Нийт эзэлхүүн              20-50 мкл            Нийт эзэлхүүн            20-50 мкл


                                    6 дугаар хүснэгт. ПГУ-ын машинд дулаан солих үечлэл
                              0
                                                                             0
                     1.     94 С- 2 мин                              1.    95 С- 5 мин
                                                                             0
                              0
                     2.     94 С- 0.5 мин                            2.    94 С- 1 мин
                                                                             0
                              0
                     3.     50 С- 0.5 мин           35 мөчлөг        3.    46 С -1 мин             30 мөчлөг
                                                                             0
                              0
                     4.     72 С- 1 мин                              4.    72 С- 1 мин
                                                                             0
                              0
                     5.     72 С- 10 мин                             5.    72 С- 10 мин
                                                                            0
                             0
                     6.     4 С- ∞                  Хадгалах         6.    4 С- ∞                  Хадгалах

                                               3.3.3.  ДНХ-ийн дараалал тогтоох
                        Нийт  8  өсгөвөрийг  сонгон  авч  ДНХ-ийн  дараалал  тогтоох  шинжилгээг  хийв.
                     Эдгээрт  У№5, ӨВ 29, За-Ул-сүү, Го 81, У-ту-1, БН-7, За- ул№1,  Хо38 болно.

                     ДНХ-ийн  дараалалыг  “Applied  Biosystem  3130  xl  Genetic  Analyzers”  машиныг
                     ашиглан гаргаж, AG1, AG2 праймеруудын гарах өгөгдлүүдийг хооронд нь “Vector

                     NTI 10.03 version” программаар гүйцэтгэж , “Mega 4.1 version” программ ашиглан
                     “neighbour-joining” аргаар удам зүйн модыг байгуулав.

                            ПГУ-ын  бүтээгдэхүүнийхээ концентраци болон цэвэршилтийг “Nano drop”
                     машинаар  үзсэн.


                     Гомбосүрэнгийн Өлзийсайхан                                                               26
   24   25   26   27   28   29   30   31   32   33   34