Page 25 - Гахай, тахианы микоплазмозын оношлогоо
P. 25
Гахай, тахианы микоплазмозын оношлогоо
3.3 Нян судлалын шинжилгээний арга зүй
Нян судлалын шинжилгээнд “PPLO (Pleuropneumonia-like organism) broth”
болон “PPLO agar” дээр эрүүл адууны цусны ийлдэс (10%), глюкоз, шинэ
бэлтгэсэн хөрөнгөний ханд (25%), DNA Herring загасны ДНХ натрийн пируват
(25%), фенолын улаан (1%), пенициллинийг тус тус нэмсэн тэжээлт орчинг
ашиглав. Дээжүүдийг 5-10% нүүрс хүчлийн хий (CO2)-тэй орчинд 48-96 цаг
өсгөвөрлөж M. hyopneumoniae, M. gallisepticum, M. synoviae-г ялган авав.
Тэжээлт орчин бэлтгэх
Дрожны ханд бэлтгэх
- Дрож – 25 гр
- Нэрмэл ус – 100 мл-г хийж 121°С – д 15 минут ариутгана. 55°С хүртэл
хөргөсний дараа 12000 эрг/ мин-д 20 минут центрфугдэж дээд шингэнийг
нь авав.
Тэжээлт орчин бэлтгэх (1000 мл)
- Стандарт PPLO broth (Difco) – 22.5 гр
- Глюкоз – 10 мл
- DNA from herring sperm – 0.2 гр
- Нэрмэл ус - 690 мл-г хийж pH=7.6-7.8-д тохируулж 121°С-д 15 минут
ариутгав.
Ариутгасан тэжээлт орчинг 56°С хүртэл хөргөсний дараа
- Адууны ариун ийлдэс– 200 мл
- Дрожны ханд (25%) – 120 мл
- Sodium pyruvate (25%) – 20 мл
- 1%-н phenol Red – 3 мл
- Penicillin – 1.5 Mill. I.E
- Thalliumacetate (10%) - 2 мл – ийг нэмэв.
Дээрх тэжээлт орчныг хуруу шилэнд 3 мл- ээр савлаж 37°C-т 24-48 цаг тавьж
ариун чанарыг шалгав. Бэлтгэсэн тэжээлт орчин улаан, ягаавтар өнгөтэй байна.
25