Page 16 - Penunutun Praktikum_Mirobiologi Aquatik

(kultur bakteri aerob) dan pH sesuai serta 4) Harus bebas dari mikroba lain dan steril.

Bahan dan Alat

Bahan : Aquadesh, Media Nutrien Agar (NA), Media Nutrien Broth (NB), Media PDA,
Tryptone Soya Agar (TSA), kapas, kertas layang, plastik, alkohol 70%, spritus,

kapas steril, aluminium foil, tissu, kertas label.
Alat: Lampu bunsen, cawan petri, tabung reaksi, erlenmeyer, timbangan, hot plate,

stirer, batang pengaduk, spatula, autoklaf, beaker glas, jarum ose, mikro pipet,
pinset, gelas ukur, rak tabung reaksi, botol aquades, botol semprot/spyer,

timbangan digital, autoclave, oven, incubator, lemari pendingin/freezer, stirer,

vortex.

Prosedur Kerja

A. Pembuatan Media Umum (Cara I):
1. Timbang media sesuai prosedur di kemasan. Media ditimbang secara hati-hati

lalu masukkan kedalam Erlenmeyer
2. Media yang ada di erlemnmeyer ditambah aquades dan aduk sampai homogen

dengan batang
pengaduk

3. Setelah homogen media dipanaskan dengan hati-hati menggunakan

penangas/elemen
pemanas sambil diaduk sampai media tercampur homogen

(ditunjukkan dengan warna yang kuning jernih). Perhatian: pada saat
pemanasan jangan sampai terbentuk buih berlebihan sampai meluap!

4. Media dituangkan ke dalam tabung reaksi dengan volume tertentu menggunakan
pipet volume: 5 ml untuk agar miring, 10 ml untuk agar tegak, lalu diautocklaf.

Tutup tabung reaksi dengan penutup tabung (penutupan jangan terlalu rapat!)

5. Media NB dituangkan ke dalam tabung reaksi masing- masing tabung reaksi 8

ml. Tutup tabung reaksi dengan kapas atau penutup tabung (penutupan jangan
terlalu rapat!)

6. Sterilkan seluruh media dalam tabung reaksi tersebut dengan menggunakan
o
autoklaf selama 15 menit, tekanan 1 atm 121 C. (Pelajari cara mengoperasikan

autoklaf dengan benar!)

7. Setelah diotoklaf: media NA 10 ml dalam tabung reaksi diletakkan tegak pada

15