Page 18 - Penunutun Praktikum_Mirobiologi Aquatik

pinggan atau agar miring

6. Sterilkan media dengan autoklaf

Nutrien Broth (NB)

Komposisi untuk media NB sama dengan NA tetapi tidak memakai agar sebagai

pemadat. Proses pembuatannyapun lebih sederhana, tidak memerlukan panas, peptone
dan beef extract akan mudah larut sempurna pada air suhu kamar jika diaduk.

C. Pembuatan Media Selektif:

Media selektif yang dimodifikasi (Yunilas et al., 2013) untuk isolasi bakteri
lignoselulolitik menggunakan: (0,5 g pepton, 0,5 g yeast agar, 0,1 g K2HPO4, 0,02 g

MgSO4. 7H2O, 1 g Na2CO3, 20 g agar, 0,25 g CMC, 0,25 g xylan, 0,25 g lignin, 0,25

g mannan.
Media selektif Czapek Dox Agar (CDA) yang dimodifikasi (Yunilas, 2016)

untuk isolasi fungi selulolitik yaitu: 0,2% NaNO 3; 0,05% KCL; 0,05% MgSO 4.7H 2O;

0.001% FeSO 4.7H 2O; 0,05% KH 2PO 4; 0,04% yeast ekstrak; 2% agar dan 1% (masing-
masing CMC, xylan, lignin dan manan), streptomisin 0,01 %, pH diatur 4,5.

Prosedur Kerja

1. Timbang semua bahan sesuai formulasinya, lalu masukkan kedalam Erlenmeyer
2. Media yang ada di erlemnmeyer ditambah aquades dan aduk sampai homogen

dengan batang
pengaduk

3. Setelah homogen media dipanaskan dengan hati-hati menggunakan
penangas/elemen
pemanas sambil diaduk sampai media tercampur homogen

4. Media dituangkan ke dalam tabung reaksi dengan volume tertentu menggunakan
pipet volume: 5 ml untuk NA miring, 10 ml untuk NA tegak, lalu diautocklaf.

Tutup tabung reaksi dengan penutup tabung (penutupan jangan terlalu rapat!)

5. Sterilkan seluruh media dalam tabung reaksi tersebut dengan menggunakan

o
autoklaf selama 15 menit, tekanan 1 atm 121 C. (Pelajari cara mengoperasikan
autoklaf dengan benar!)

6. Setelah diotoklaf: media dalam tabung reaksi diletakkan tegak pada rak tabung
dan biarkan memadat atau miring dan biarkan memadat.

17