Page 22 - Isolasi Pemurnian dan Identifikasi Senyawa Golongan Flavanoid

kepolarannya, dan kecepatannya untuk sampai ke detektor (waktu retensinya) akan berbeda,
hal ini akan teramati pada spektrum yang puncak-puncaknya terpisah.

HPLC dapat menganalisa secara kualitatif dan kuantitatif. Pada proses kualitatif cara

yang paling umum untuk mengidentifikasi adalah dengan melihat Retention time (RT).
Peak yang mempunyai RT yang sama dengan standard umumnya adalah sebagai peak milik

analat. Selain melihat RT hal lain yang perlu dilihat adalah spektrum 3D dari signal
kromatogram.

Kemudian melalui analisa kuantitatif dapat diketahui kadar komponen yang dianalisis

di dalam sampel. Yang berperan dalam proses separasi pada system HPLC adalah kolom.
Setelah komponen dalam sample berhasil dipisahkan, tahap selanjutnya adalah proses

identifikasi. Hasil analisa HPLC diperoleh dalam bentuk signal kromatogram. Dalam
kromatogram akan terdapat peak-peak yang menggambarkan banyaknya jenis komponen

dalam sample.
3.3.4 Kromatografi Gas

Kromatografi gas (KG) merupakan jenis kromatografi yang umum digunakan

dalam analisis kimia untuk pemisahan dan analisis senyawa yang dapat menguap tanpa
mengalami dekomposisi. Penggunaan umum KG mencakup pengujian kemurnian senyawa

tertentu, atau pemisahan komponen berbeda dalam suatu campuran (kadar relatif komponen
tersebut dapat pula ditentukan). Dalam beberapa kondisi, KG dapat membantu

mengidentifikasi senyawa. Dalam kromatografi preparatif, KG dapat digunakan untuk

menyiapkan senyawa murni dari suatu campuran.
Dalam kromatografi gas, fase gerak merupakan gas yang memiliki sifat inert seperti

helium dan nitrogen. Fase diam merupakan lapisan cairan mikroskopis atau polimer yang
akan menempati kolom. Kolom merupakan salah satu komponen di gas chromatography

yang akan membatasi laju pergerakan berdasarkan suhu, waktu dan ukuran senyawa. Waktu

Retensi atau dikenal juga dengan istilah retension time, merupakan kisaran waktu analisa
ketika proses sample ditangkap oleh detektor.

Secara prinsip, kromatografi gas terdapat beberapa perbedaan yaitu proses pemisahan
campuran terjadi antara fasa diam cairan dan fasa gerak gas, kolom yang dilalui fasa gas

terletak di dalam oven dengan temperatur gas yang dapat dikendalikan, konsentrasi senyawa

Isolasi Pemurnian dan Identifikasi Senyawa Golongan Flavanoid 22