Page 18 - Isolasi Pemurnian dan Identifikasi Senyawa Golongan Flavanoid

Contoh : Kromatografi Kertas Dan Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (HPLC)
b. Fasa gerak cair dan fasa diam padat

Contoh : Kromatografi Lapis Tipis (KLT) dan Kromatografi Kolom.

c. Fasa gerak gas dan fasa diam cair
Contoh : Kromatografi Gas Cair (GLC)

d. Fasa gerak gas dan fasa diam padat
Contoh : Kromatografi Gas Padat (GSC)

Teknik kromatografi untuk senyawa organic bertujuan untuk Analisa kualitatif,

preparatif, dan kauntitatif. Berikut ini penjelasan mengenai teknik kromatografi yang umum
digunakan dilaboratorium kimia organic.

3.3.1 Kromatografi Kolom
Kromatografi kolom adalah jenis kromatografi cair yaitu fasa gerak cair yang disebut

eluen dan fasa diam padatan yang dikenal dengan istilah adsorben sehingga prinsip kerjanya
adalah adsorbsi atau cair yang prinsip kerjanya adalah partisi. Kromatografi kolom

diterapkan secara luas untuk pemisahan senyawa – senyawa hasil alam khususnya metabolit

sekunder.
Pemisahan terjadi karena terjadinya perbedaan daya serap atau partisi fasa diam

terhadap komponen – komponen sampel yang akan dipisahkan yang digerakkan oleh fasa
gerak (eluen). Keuntungan utama kromatografi kolom adalah biaya yang rendah dan

kemudahan membuang fasa diam yang telah digunakan. Kemudahan pembuangan fasa diam

ini mencegah kontaminasi silang dan degradasi fasa diam akibat pemakaian ulang ataudaur
ulang.

Kromatografi kolom preparatif klasik berupa tabung kaca dengan diameter antara
5 mm hingga 50 mm dengan panjang 5 cm hingga 1 m dengan keran dan pengisi (dengan

sumbat kaca atau serat kaca – untuk mencegah hilangnya fasa diam) pada bagian bawah.

Dua metode yang umum digunakan untuk preparasi kolom adalah: metode kering dan
metode basah.

Komponen-komponen tunggal tertahan oleh fasa diam secara berbeda satu sama lain
pada saat mereka bergerak bersama eluen dengan laju yang berbeda melalui kolom. Di akhir

kolom, mereka terelusi satu per satu. Selama keseluruhan proses kromatografi, eluen

Isolasi Pemurnian dan Identifikasi Senyawa Golongan Flavanoid 18