Page 147 - Traité de Chimie Thérapeutique 2 : Médicaments Antibiotiques

3. LES CÉPHALOSPORINES 137

Recherche des substances apparentées (produits intermédiaires de l'hémi-
synthèse ou secondaires; éventuels produits de dégradation) : par C.L.H.P.
Les impuretés potentielles, par exemple en série 7-(-2-arylacétamido)-céphème
avec un substituant a-amino, peuvent être : l'épimère S, pour certains, le com-
posé majeur de dégradation, le g, ( au lieu du A,a), l'épimère en 7 (tra-
ces infimes), le dimère résultant de l'attaque de la fonction aminée de la chaine
latérale par le carboxyle d'une autre molécule, enfin le composé provenant
de l'attaque de la fonction aminée par l'amino-acide utilisé pour synthétiser
la chaine latérale.
Détermination de la teneur en eau par dessiccation à 100-105°C ou semi-
microdosage selon KARL FISCHER

4.4. DOSAGE

Ils rélèvent de méthodes chimiques, physiques ou encore biologiques :
a) Dosage par lodométrie
Si les céphalosporines ne sont pas oxydables par l'iode, l'acide céfalosporoique,
obtenu après hydrolyse alcaline, est oxydé quantitativement par l'iode en milieu
acétique.
L'excès d'iode est dosé en retour par le thiosulfate de sodium en présence
d'empois d'amidon et en milieu tamponné.
b) Dosage par protométrie
Après dissolution dans le DMF, le carboxyle en 4 est dosé par une solution titrée
de méthylate de sodium. le point de fin de titrage est apprécié par potentiomé-
trie ou virage d'un indicateur coloré.
c) Dosage physico-chimique
Par spectroscopie U.V. avec un échantillon standard en référence;
- Par C.L.H.P..
d) Dosage mlcroblologlque
Son principe consiste à comparer l'inhibition de la croissance de bactéries sensi-
bles provoquée par le produit à tester avec celle induite par le produit de référence.
Le dosage est pratiqué par turbidimétrie ou diffusion en gélose selon un pro-
tocole décrit par la Pharmacopée en présence de Staphylococcus aureus, Esche-
richia coli, Streptococcus faecalis, Bacillus subtilis, ou Sarcina lutea.

4.5. CONTROLES BIOLOGIQUES
DES CÉPHALOSPORINES

Pour les préparations destinées à l'administration parentérale ( la majorité des
céphalosporines), des contrôles biologiques sont exigés :
contrôle de la stérilité ;
recherche des pyrogènes ;
recherche d'une toxicité anormale sur la souris ;
parfois, recherche de substances hypotensives.