Page 24 - Тахианаас хүнсний хордлого үүсгэгч CAMPYLOBACTER SPP.-ийг илрүүлсэн судалгааны дүн
P. 24
[ШИНЖЛЭХ УХААНЫ МАГИСТРЫН ЗЭРЭГ ГОРИЛСОН БҮТЭЭЛ] Арга зүй [ШИНЖЛЭХ УХААНЫ МАГИСТРЫН ЗЭРЭГ ГОРИЛСОН БҮТЭЭЛ] Үр дүн
Campylobacter spp. - ийн Multi locus sequence typing шинжилгээнд ашигласан праймерууд ГУРАВДУГААР БҮЛЭГ
Хүснэгт 8 2.3 СУДАЛГААНЫ АЖЛЫН ҮР ДҮН
Праймерийн олиго дараалал 5’-3’
Сонго дог ген Хөтлөгч –Forward Дагагч- Reverse 2.3.1 Микробиологийн шинжилгээний үр дүн
aspA asp-A9,5’- AGTACTAATGATGCTTATCC-3’ asp-A10 5’ATTTCATCAATTTGTTCTTTGC-3’ Улаанбаатар хотын 2 дүүргийн 9 тахианы фермийн 95 тахианы шулуун
asp- S3, 5’- CCAACTGCA AGA TGCTGTACC-3’ asp-S6, 5’-TTCATTTGCGGTAATACCATC-3’ гэдэснээс авсан арчдасны дээжийг урьдчилан бэлтгэсэн престон шөлөнд өсгөвөрлөж,
glnA gln-A1,5’-TAG GAA CTTGGCATCATATTACC-3’ gln-A2, 5’- TTGGACGAGCTTCTACTGGC-3’ 42°С-ийн хэмд 24 цаг, нүүрс хүчлийн хий бүхий орчин бүрдүүлдэг О2-ыг агаараас
gln-S3,5’-CATGCA ATCAATGAAGAAAC-3, gln-S6, 5’ TTCCATAAGCTCATATGAAC-3’
gltA gln-A1,5’GGGCTTGACTTCTACAGCTACTTG-3’ gln-A2,5’-CCAAATAAAGTTGTCTTGGACGG-3’ шингээн авч, СО2 үүсгэгч anaeroPack-MicroAero (Mitsubushi Gas Chemical Co.,Inc,
gln-S3,5’-CTTATATTGATGGAGAAAATGG-3’ glnS6, 5’-CCAAAGCGCACCAATACCTG-3’ Japan) болон лабораторийн зориулалттай битүүмжлэл бүхий хуванцар сав ашиглан
gly gly-A1,5’- GAGTTAGAGCGTCAATGTGAAGG-3’ gly- A2, 5’-AAACCTCTGGCAGTAAGGGC-3’ өсгөвөрлөв [7]. Өсгөвөр (престон шөл)-ийг 24 цагийн дараа шалгахад дээжүүд дороо
gly-S3,5’- AGCTAATCAAGGTGTTTATGCGG-3’ gly- S6, 5’-AGGTGATTATCCGTTCCATCGC-3’ тунадастай, булингартай, бор саарал өнгөтэй байв (зураг 1). Дараа нь урьдчилан
pgm pgm-A8,5’ CACAACATTTTTCATTTCTTTTTC- баяжуулсан орчин (Престон шөл)-оос сонгомол баяжуулах орчин (mCCDA)- т 48 цаг
pgm-A7, 5’ TACTAATAATATCTTAGTAGG-3’ 3’
pgm-S5, 5’ GGTTTTAGATGTGGCTCATG-3’ өсгөвөрлөж нүүрс хүчлийн хий бүхий орчин бүрдүүлдэг О2-ыг агаараас шингээн авч,
pgm-S2, 5’ TCCAGAATAGCGAAATAAGG-3,
СО2 үүсгэгч anaeroPack-MicroAero (Mitsubushi Gas Chemical Co.,Inc, Japan) болон
tKt tKt-A3, 5’ GCAAACTCAGGACACCCAGG-3’ tKt-A6, 5’ AAAGCATTGTTAATGGCTGC-3’
tKt-S5, 5’ GCTTAGCAGATATTTTAAGTG-3’ tKt-S6,5’ AAGCCTGCTTGTTCTTTGGC-3’ лабораторийн зориулалттай битүүмжлэл бүхий хуванцар сав ашиглан өсгөвөрлөв.
Өсгөвөрийг 48 цагийн дараа шалгахад mCCDAагарт (Зураг 2) Campylobacter spp.-ийн
unc unc-A7, 5’ ATGGACTTAAGAATATTATGGC-3’ unc-A8, 5’ ATAAATTCCATCTTCAAATTCC-3’
unc-S3, 5’ AAAGTACAGTGGCACAAGTGG-3’ unc-S4, 5’ TGCCTCATCTAAATCACTAGC-3’ хэв шинж колони өсгөвөржсөн ба тэдгээрийн ихэнхи нь бүхий хавтгай саарал өнгөтэй,
жигд бус ирмэгтэй, колонийг хусаж үзэхэд наалдамхай шинж чанарыг үзүүлж байв.
Үүнээс түрхэц бэлтгэн, Грамын аргаар будаж микроскопоор харахад грам сөрөг, муруй,
спирал хэлбэрийн (Зураг 3) савханцарууд харагдав. Campylobacter spp.-ийн төст
колониос нэг колонийг сонгон mCCDA-т тарилт хийж агаартай, агааргүй, бага
хүчилтөрөгчтэй (микроаэробик) орчингуудад тус тус 48 цаг өсгөвөрлөв. Микроаэробик
орчинд ургасан Campylobacter spp. төст хавтгай саарал өнгөтэй, жигд бус ирмэгтэй,
колонийг хусаж үзэхэд наалдамхай шинж чанарыг үзүүлж байсан колониос урьдчилан
бэлтгэсэн бруцелла шөлөнд тарилт хийж 37 хэмийн термостатад 48 цаг өсгөвөрлөв.
Микроаэробик орчин бүрдүүлэхдээ нүүрс хүчлийн хий бүхий орчин бүрдүүлдэг О2-ыг
агаараас шингээн авч, СО2 үүсгэгч anaeroPack-MicroAero,(Mitsubushi Gas Chemical
Co.,Inc, Japan) болон лабораторийн зориулалттай битүүмжлэл бүхий хуванцар сав
ашиглан өсгөвөрлөв. Мөн mCCDA-т ургасан Campylobacter spp.-ийн төст колониос
биохимийн идэвхийг каталаза болон оксидаза тестийн идэвхийг шалгахад каталаза
эерэг, оксидаза эерэг дүн үзүүлж байв (Зураг 4). Дараах шинжилгээний үр дүнгээ сурах
бичиг, хэвлэлд дурьдсан Campylobacter-ийн морфологи бүтэц, шинж чанартай дүйж
үзэхэд Campylobacter-ийн бүлгийн нянгийн шинж төлөвийг агуулсан тул уг нян мөн
гэсэн дүгнэлтэнд хүрсэн болно. Микробиологийн шинжилгээгээр судалгаанд авсан 95
24 25