Page 111 - 猪场生产管理手册

③免疫胶体金技术检测猪瘟抗原和抗体

a.免疫胶体金技术检测抗原
将猪瘟病毒抗原检测卡从铝箔袋中取出，水平放置并作好标记。

在检测卡的加样孔内加入 2 滴（70~100µL）待检血清/血浆/全血样品或鼻拭子稀
释液。20min 内观察并记录试验结果。
结果判定
阳性：对照线区（C）和检测线区（T）各出现一条紫红色线。

阴性：只有对照线区（C）出现一条紫红色线。
无效：未出现紫红色线或只在检测线区（T）出现紫红色线，对照线区（C）未
出现紫红色线。
b.免疫胶体金技术检测抗体

将猪瘟病毒抗体检测卡从铝箔袋中取出，水平放置并作好标记。
在检测卡的加样孔内加入 2 滴（70~100µL）待检血清/血浆/全血样品。20min 内
观察并记录试验结果。
结果判定

阳性：对照线区（C）和检测线区（T）各出现一条紫红色线。
阴性：只有对照线区（C）出现一条紫红色线。
无效：未出现紫红色线或只在检测线区（T）出现紫红色线，对照线区（C）未
出现紫红色线。

c.注意事项
检测样品可以是血清/血浆/全血。
检测卡从铝箔袋中取出后，应尽快进行实验，避免放置于空气中时间过长，试
剂吸潮后将失效。

实验环境应保持一定湿度，避风，避免在过高温度下进行实验。
试剂盒在室温下保存，如在 2~8℃冷藏，使用前应平衡至室温后方可打开铝箔袋
进行检测操作。

试验方法的局限性 本试验可以对猪血清/血浆/全血样品中的猪瘟病毒和抗体
进行定性检测，但用于猪瘟诊断时应结合其它症状和检测结果。

④猪瘟正向间接血凝试验

a.检测前，应将冻干诊断液，每瓶加稀释液 5mL 浸泡 7~10d 后方可应用。

b.稀释待检血清：血凝板的第 1 孔至第 6 孔各加稀释液 50µL。吸取待检血清 50µL
加入第 1 孔，混匀后从中取出 50µL 加入第 2 孔，依此类推直至第 6 孔混匀后丢弃
50µL，从第 1 孔至第 6 孔的血清稀释度依次为 1:2、1:4、1:8、1:16、1:32、1:64。

c.稀释阴性和阳性对照血清：在血凝板上的第 11 排第 1 孔加稀释液 60µL，加入
阴性血清 20µL 混匀后取出 30µL 丢弃，此孔即为阴性血清对照孔。
80