Page 116 - 猪场生产管理手册

伪狂犬病毒 gG 蛋白致敏乳胶抗原、伪狂犬病毒 gE 蛋白致敏乳胶抗原、伪狂犬

病毒致敏乳胶抗原、伪狂犬病毒阳性血清和注射 gG 基因缺失疫苗血清、玻片、吸头
等。
③动物接种试验材料

研钵、生理盐水、青霉素、链霉素、冰箱、离心机、离心管、试管、烧杯、注
射器、饲养笼、消毒液（百毒杀）等。
④猪伪狂犬病 gE 抗体酶联免疫吸附试验材料

伪狂犬病 gE 抗体检测试剂盒。
⑤猪伪狂犬病抗体酶联免疫吸附试验材料

猪伪狂犬病抗体检测试剂盒。

⑥伪狂犬病毒 PCR 试剂盒检测试验
器材及药品：组织研磨器、眼科剪、眼科镊、一次性注射器、琼脂糖、灭菌 1.5mL

离心管和吸头（10µL、200µL、1000µL）、伪狂犬 PCR 试剂盒。
（2）方法步骤

①直接免疫荧光试验

a.样品采集 扑杀可疑动物，取脑、淋巴结、扁桃体迅速送检实验室，如不能及

时送出，必须冻结保存，避免腐败、自溶。本法也可用于对疑似伪狂犬病病毒的培
养物进行鉴定。

b.切片制备 将样品组织块切成 1cm×1cm 的面，不经任何固定处理，直接贴于

冰冻切片托上，进行切片，切片厚度要求 5~7µm，将切片展贴于 0.8mm×1mm 厚的
洁净载玻片上。

c.固定 将切片置纯丙酮中固定 15min，取出立即放入 0.01mol/L、pH7.2 的磷酸
盐缓冲液中，轻轻漂洗 3~4 次，取出，自然干燥后尽快进行荧光抗体染色。

d.染色 将伪狂犬病荧光抗体滴加于切片表面，置温盒内于 37℃作用 30min，取
出后放入磷酸盐缓冲液中充分漂洗，再用 0.5mol/L，pH9.0~9.5 碳酸盐缓冲甘油封固

盖片（0.1mm 厚），染色后应尽快镜检，必要时可放置低温待检。
e.观察 将染色后的切片标本置激发光为蓝紫光或紫外光的荧光显微镜下观察。

f.判定 荧光显微镜视野中，细胞中出现明亮的黄绿色荧光，判为伪狂犬病病毒
感染阳性。

②猪伪狂犬病 gG 鉴别诊断乳胶凝集试验

伪狂犬病 gG 鉴别诊断乳胶凝集试验是用伪狂犬病毒 gG 基因的基因工程表达产

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