Page 117 - 猪场生产管理手册
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物致敏乳胶抗原以检测动物血清、全血或乳汁中抗 gG 蛋白的抗体。用于伪狂犬病毒
感染猪与 gG 基因缺失疫苗免疫猪的免疫学鉴别诊断。
a.对照试验 检测之前应做对照试验,出现如下结果试验方可成立,否则应重试,
若重试仍不出现如下结果则停止使用:伪狂犬病毒阳性血清与 gG 蛋白致敏乳胶抗原
呈阳性凝集;注射 gG 基因缺失疫苗的猪血清与 gG 蛋白致敏乳胶抗原呈阴性凝集;
伪狂犬病毒阳性血清和注射 gG 基因缺失疫苗的猪血清与伪狂犬病毒致敏乳胶抗原
均呈阳性凝集。
b.检测试验 待检血清不需热灭活或其它方式的灭活处理。
取待检血清一滴,置于玻片上,加 gG 蛋白致敏乳胶抗原一滴,用牙签混匀,搅
拌并摇动 1~2min,3~5min 内观察结果。
c.判定标准 gG 蛋白致敏乳胶抗原与血清反应的凝集颗粒较细,可能出现以下
几种凝集结果,即:
“++++” 全部乳胶凝集,颗粒聚于液滴边缘,液体完全透明;
“+++” 大部分乳胶凝集,颗粒明显,液体稍混浊;
“++” 约一半乳胶凝集,但颗粒较细,液体较混浊;
“+” 有少许凝集,液体呈混浊;
“-” 液滴呈原有的均匀乳状。
以出现“++”以上凝集者判为阳性凝集。
d.猪伪狂犬病 gE 鉴别诊断 乳胶凝集试验同 gG 鉴别诊断乳胶凝集试验。
③动物接种试验
a.接种病料制备 采取病猪脑组织,磨碎后,加生理盐水,制成 10%悬液,同时
每毫升加青霉素 1000IU、链霉素 1mg,放入 4℃冰箱中过夜,离心沉淀,取上清液,
备用。
b.接种观察 取接种病料 1~2mL,皮下注射试验家兔后腿外侧部,家兔接种后
36~48h,注射部位的皮肤发生剧痒,自行啃咬,直至掉毛、破损和出血。继之四肢
出现麻痹。实验兔多于出现症状后数小时死亡,即可判定为阳性。个别情况下,可
能由于病料含毒量低,潜伏期可延长到 7d。
④猪伪狂犬病 gE 抗体酶联免疫吸附试验
参照猪伪狂犬病 gE 抗体检测试剂盒说明书操作。
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