Page 112 - 猪场生产管理手册

在血凝板上的第 12 排第 1 孔加稀释液 70µL，第 2~7 孔各加稀释液 50µL，取阳

性血清 10µL 加入第 1 孔混匀，并从中取出 50µL 加入第 2 孔混匀后取出 50µL 加入
第 3 孔……直到第 7 孔混匀后弃 50µL，该孔的阳性血清稀释度为 1:512。
d.在血凝板上的第 1 排第 8 孔加稀释液 50µL，作为稀释液对照孔。

e.判定方法和标准：先观察阴性血清对照孔和稀释液对照孔，红血球应全部沉入
孔底，无凝集现象“-”或呈“+”的轻度凝集为合格；阳性血清对照呈“+++”凝集
为合格。
在以上 3 孔对照合格的前提下，观察待检血清各孔的凝集程度，以呈“++”凝
集的待检血清最大稀释度为其血凝效价（血凝价）。血清的血凝价达到 1:16 为免疫合
格。

“-”表示红细胞 100%沉于孔底，完全不凝集；
“+”表示约有 25%的红细胞发生凝集；
“++”表示 50%红细胞出现凝集；

“+++”表示 75%红细胞凝集；
“++++“表示 90~100%红细胞凝集。
注意事项：
a.勿用 90°或 130°血凝板，以免误判。
b.污染严重或溶血严重的血清样品不宜检测。

c.冻干血凝抗原，必须加稀释液浸泡 7~10d，方可使用，否则易发生自凝现象。
d.用过的血凝板，应及时冲冼干净，勿用毛刷或其他硬物刷洗板孔，以免影响孔
内光洁度。

e.使用血凝抗原时，必须充分摇匀，瓶底应无血球沉积。
f.液体血凝抗原 4~8℃贮存有效期为四个月，可直接使用。冻干血凝抗原 4~8℃
贮存有效期为三年。
g.如来不及判定结果或静置 2h 结果不清晰，可放置第 2 天判定。
h.每次检测，只设阴性、阳性血清和稀释液对照各 1 孔。

i.稀释不同的试剂要素时，必须更换吸头。
j.血凝板和吸头洗净后，自然干燥，可重复使用。

⑤猪瘟抗体的 ELISA 检测

此为目前广泛使用的方法，根据检测试剂盒的说明进行样品检测和结果判定。
2.口蹄疫检测技术

猪口蹄疫实验室检测常用的方法包括：乳鼠接种试验、口蹄疫中和试验、口蹄
疫琼脂扩散试验、猪口蹄疫抗体金标快速检测法。
（1）实验材料

①乳鼠接种试验

81