Page 113 - 猪场生产管理手册
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器材:1mL 灭菌注射器、灭菌吸管及试管、灭菌滤纸、灭菌剪刀、镊子、橡胶
                 手套等。

                      药品:青霉素、链霉素、无菌生理盐水或无菌磷酸盐缓冲液。

                      实验动物:1~2 日龄和 7~9 日龄乳鼠。
                      病料:病猪水疱皮、水疱液等。

                      ②口蹄疫中和试验
                      药品:口蹄疫 A 型、O 型、C 型和 Asia 型适应毒,标准阳性和阴性血清。

                      ③口蹄疫琼脂扩散试验
                      器材:平皿、打孔器、天平、恒温箱。

                      药品:琼脂糖或琼胶素、叠氮钠、氯化钠,0.01mol/L  PBS。待检血清及标准
                 阳性、阴性血清。已知口蹄疫型别的病毒抗原。

                      ④猪口蹄疫抗体金标快速检测法
                      器材:免疫胶体金层析技术检测卡(内装干燥剂和吸样管)、离心管、检测对照

                 卡。
                      样品:待检血清。

                      (2)方法步骤



                      ①乳鼠接种试验


                      依据 1~2 日龄乳鼠和 7~9 日龄乳鼠发病死亡现象将猪口蹄疫与猪水疱病进行区

                 别。
                      a.被检病毒液的制备。将病猪的水疱皮先用灭菌的生理盐水或磷酸盐缓冲液冲洗

                 两次,并用灭菌滤纸吸去水分,称重,剪碎,研磨,然后用每毫升加青霉素、链霉
                 素各 1000IU 的无菌生理盐水或无菌磷酸盐缓冲液制成 10 倍稀释乳剂,在 4~10℃冰

                 箱中作用 2~4h 或 37℃温箱中作用 1h,备用。
                      b.乳鼠接种病毒液。可在注射前提出母鼠置于另一容器内,选择 1~2 日龄和 7~9

                 日龄乳鼠各 4~8 只,分为两组。分别于其背部皮下各注射被检病毒液 0.1mL,待全

                 部注射完毕后,放回母鼠。注射时须用镊子夹着小鼠的背部皮肤,不要用手接触,
                 如果手触摸了小鼠,可在注射后于其体表擦少许乙醚以除去气味,以免乳鼠体表因
                 染上人体气味而被母鼠吃掉。

                      c.结果判定。注射后观察 7d,乳鼠如发病多在 24~96h 死亡,如 1~2 日龄和 7~9

                 日龄乳鼠均死亡,即可认为是口蹄疫;如 1~2 日龄乳鼠发病死亡,而 7~9 日龄乳鼠
                 仍健活,即可认为是猪水疱病。




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