Page 113 - 猪场生产管理手册
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器材:1mL 灭菌注射器、灭菌吸管及试管、灭菌滤纸、灭菌剪刀、镊子、橡胶
手套等。
药品:青霉素、链霉素、无菌生理盐水或无菌磷酸盐缓冲液。
实验动物:1~2 日龄和 7~9 日龄乳鼠。
病料:病猪水疱皮、水疱液等。
②口蹄疫中和试验
药品:口蹄疫 A 型、O 型、C 型和 Asia 型适应毒,标准阳性和阴性血清。
③口蹄疫琼脂扩散试验
器材:平皿、打孔器、天平、恒温箱。
药品:琼脂糖或琼胶素、叠氮钠、氯化钠,0.01mol/L PBS。待检血清及标准
阳性、阴性血清。已知口蹄疫型别的病毒抗原。
④猪口蹄疫抗体金标快速检测法
器材:免疫胶体金层析技术检测卡(内装干燥剂和吸样管)、离心管、检测对照
卡。
样品:待检血清。
(2)方法步骤
①乳鼠接种试验
依据 1~2 日龄乳鼠和 7~9 日龄乳鼠发病死亡现象将猪口蹄疫与猪水疱病进行区
别。
a.被检病毒液的制备。将病猪的水疱皮先用灭菌的生理盐水或磷酸盐缓冲液冲洗
两次,并用灭菌滤纸吸去水分,称重,剪碎,研磨,然后用每毫升加青霉素、链霉
素各 1000IU 的无菌生理盐水或无菌磷酸盐缓冲液制成 10 倍稀释乳剂,在 4~10℃冰
箱中作用 2~4h 或 37℃温箱中作用 1h,备用。
b.乳鼠接种病毒液。可在注射前提出母鼠置于另一容器内,选择 1~2 日龄和 7~9
日龄乳鼠各 4~8 只,分为两组。分别于其背部皮下各注射被检病毒液 0.1mL,待全
部注射完毕后,放回母鼠。注射时须用镊子夹着小鼠的背部皮肤,不要用手接触,
如果手触摸了小鼠,可在注射后于其体表擦少许乙醚以除去气味,以免乳鼠体表因
染上人体气味而被母鼠吃掉。
c.结果判定。注射后观察 7d,乳鼠如发病多在 24~96h 死亡,如 1~2 日龄和 7~9
日龄乳鼠均死亡,即可认为是口蹄疫;如 1~2 日龄乳鼠发病死亡,而 7~9 日龄乳鼠
仍健活,即可认为是猪水疱病。
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