Page 104 - MODUL ANALISIS MIKROBIOLOGI_Neat
P. 104
Cara Kerja :
· Inokulasikan Bacillus sp. Dan E. coli pada Skim Milk Agar (SMA)
o
· Inkubasi pada suhu 37 C selama 48 jam.
· Aktivitas proteolitik ditunjukkan oleh terbentuknya zone jernih di sekeliling
koloni.
Uji Oksidase
Enzim oksidase memegang peranan penting dalam transport elektron
selama respirasi aerobik. Sitokrom oksidase mengkatalisis oksidasi dan
reduksi sitokrom oleh molekul oksigen. Enzim oksidase dihasilkan oleh
bakteri aerob, fakultatif anaerob, dan mikroaerofilik. Mikroorganisme ini
menggunakan oksigen, sebagai akseptor elektron terakhir selama penguraian
karbohidrat untuk menghsilkan energi. Kemampuan bakteri memproduksi
sitokrom oksidase dapat diketahui dari reaksi yang ditimbulkan setelah
pemberian reagen oksidase pada koloni bakteri. Enzim ini merupakan bagian
dari kompleks enzim yang berperan dalam proses fosforilasi oksidatif.
Reagen yang digunakan adalah tetramethyl-D-phenylene diamine
dihydrocloride. Reagen akan mendonorkan elektron terhadap enzim ini
sehingga akan teroksidasi membentuk senyawa yang berwarna biru
kehitaman. Positif tertunda (warna biru muncul antara 10-60 detik setelah
ditetesi) menandakan bahwa bakteri uji memiliki sedikit enzim. Tidak adanya
perubahan warna mengindikasikan bahwa uji yang dilakukan negatif.
103
