Page 22 - Penunutun Praktikum_Mirobiologi Peternakan. 2017
P. 22
dengan pH meter. !
5. Masukkan larutan ke dalam erlenmeyer atau dapat langsung !dibuat agar
pinggan atau agar miring !
6. Sterilkan media dengan autoklaf !
Nutrien Broth (NB)
Komposisi untuk media NB sama dengan NA tetapi tidak memakai agar
sebagai pemadat. Proses pembuatannyapun lebih sederhana, tidak memerlukan
panas, peptone dan beef extract akan mudah larut sempurna pada air suhu kamar jika
diaduk.
C. Pembuatan Media Selektif:
Media selektif yang dimodifikasi (Yunilas et al., 2013) untuk isolasi bakteri
selulolitik menggunakan: (0,5 g pepton, 0,5 g yeast agar, 0,1 g K2HPO4, 0,02 g
MgSO4. 7H2O, 1 g Na2CO3, 20 g agar, 0,25 g CMC, 0,25 g xylan, 0,25 g lignin,
0,25 g mannan.
Media selektif Czapek Dox Agar (CDA) yang dimodifikasi (Yunilas, 2016)
untuk isolasi fungi selulolitik yaitu: 0,2% NaNO 3; 0,05% KCL; 0,05%
MgSO 4.7H 2O; 0.001% FeSO 4.7H 2O; 0,05% KH 2PO 4; 0,04% yeast ekstrak; 2% agar
dan 1% (masing-masing CMC, xylan, lignin dan manan), streptomisin 0,01 %, pH
diatur 4,5.
Prosedur Kerja
1. Timbang semua bahan sesuai formulasinya, lalu masukkan kedalam
Erlenmeyer
2. Media yang ada di erlemnmeyer ditambah aquades dan aduk sampai
homogen dengan batang pengaduk
3. Setelah homogen media dipanaskan dengan hati-hati menggunakan
penangas/elemen pemanas sambil diaduk sampai media tercampur homogen
4. Media dituangkan ke dalam tabung reaksi dengan volume tertentu
menggunakan pipet volume: 5 ml untuk NA miring, 10 ml untuk NA tegak,
lalu diautocklaf. Tutup tabung reaksi dengan penutup tabung (penutupan
jangan terlalu rapat!)
5. Sterilkan seluruh media dalam tabung reaksi tersebut dengan menggunakan
Mikrobiologi)Peternakan)oleh)Dr.)Ir.)Yunilas,)M.P) 18)