Page 22 - Penunutun Praktikum_Mirobiologi Peternakan. 2017
P. 22

dengan pH meter. !

                           5.  Masukkan  larutan  ke  dalam  erlenmeyer  atau  dapat  langsung  !dibuat  agar
                               pinggan atau agar miring   !

                           6.  Sterilkan media dengan autoklaf   !

                        Nutrien Broth (NB)

                               Komposisi  untuk  media  NB  sama  dengan  NA  tetapi  tidak  memakai  agar

                        sebagai  pemadat.  Proses  pembuatannyapun  lebih  sederhana,  tidak  memerlukan
                        panas, peptone dan beef extract akan mudah larut sempurna pada air suhu kamar jika

                        diaduk.

                        C. Pembuatan Media Selektif:

                               Media selektif yang dimodifikasi (Yunilas et al., 2013) untuk isolasi bakteri

                        selulolitik  menggunakan:  (0,5  g  pepton,  0,5  g  yeast  agar,  0,1  g  K2HPO4,  0,02  g
                        MgSO4. 7H2O, 1 g Na2CO3, 20 g agar, 0,25 g CMC, 0,25 g xylan, 0,25 g lignin,

                        0,25 g mannan.

                               Media selektif Czapek Dox Agar (CDA) yang dimodifikasi (Yunilas, 2016)
                        untuk  isolasi  fungi  selulolitik  yaitu:  0,2%  NaNO 3;  0,05%  KCL;  0,05%
                        MgSO 4.7H 2O; 0.001% FeSO 4.7H 2O; 0,05% KH 2PO 4; 0,04% yeast ekstrak; 2% agar

                        dan 1% (masing-masing CMC, xylan, lignin dan manan), streptomisin 0,01 %, pH

                        diatur 4,5.

                        Prosedur Kerja

                           1.  Timbang  semua  bahan  sesuai  formulasinya,  lalu  masukkan  kedalam

                               Erlenmeyer
                           2.  Media  yang  ada  di  erlemnmeyer  ditambah  aquades  dan  aduk  sampai

                               homogen dengan batang  pengaduk
                           3.  Setelah  homogen  media  dipanaskan  dengan  hati-hati  menggunakan

                               penangas/elemen  pemanas sambil diaduk sampai media tercampur homogen

                           4.  Media  dituangkan  ke  dalam  tabung  reaksi  dengan  volume  tertentu
                               menggunakan pipet volume: 5 ml untuk NA miring, 10 ml untuk NA tegak,

                               lalu  diautocklaf.  Tutup  tabung  reaksi  dengan  penutup  tabung  (penutupan
                               jangan terlalu rapat!)

                           5.  Sterilkan seluruh media dalam tabung reaksi tersebut dengan menggunakan





                        Mikrobiologi)Peternakan)oleh)Dr.)Ir.)Yunilas,)M.P)                             18)
   17   18   19   20   21   22   23   24   25   26   27