Page 357 - Traité de Chimie Thérapeutique 2 : Médicaments Antibiotiques

9. LES TÉTRACYCLINES 347

8.6.2. Caractéristiques spectrales

Le spectre UV ( figure 3) montre des maximums à 220, 270 et 358 nm.
Le spectre de RMN de 'H (figure 4) indique des signaux à a ppm 1,04. 1,50.
2,08. 2,55°. 2,65. 2,80. 2,88°.3,45'.4,64.6,05°.6,90. 7,54. 9,0°.9,52°.10,15°
et 11,5".(" : signal modifié ou supprimé par échange avec DO).
Le spectre de RMN de "°c est reproduit à la figure 5.

Valeurs des déplacements chimiques a 'c (3 ppm)
15,9 64,7 115,7 173,7
18,6 68,1 116,0 187,6
41,7 73,2 136,8 192,8
42,0 95,3 147,9 193,8
45,3 107,4 161,3
56,2 115,6 171,9

8.6.3. Identification

On a recours à une chromatographie sur couche mince ( CCM) d'un mélange
carbomère-cellulose imprégné d'un tampon phosphate-acide citrique pH 4,5 et,
au moment de l'essai, de triméthyl-2,4,6-pyridine. Le solvant est un mélange d'eau-
acétone-acétate d'éthyle/6-30-60 et on révèle par examen sous UV en présence
de vapeurs d'ammoniac. Cette technique permet de distinguer les principales
tétracyclines.

8.6.4. Essais

Ils sont assez complets, et caractéristiques des tétracyclines en général.
On vérifie le pH de la solution aqueuse (2-3), et sur une solution dans HCI-
méthanol à 1 0/o: le pouvoir rotatoire (-105° à -120°), l'absorbance spécifique
à 349 nm (300-335) et les impuretés absorbant la lumière à 490 nm.
Les substances apparentées sont estimées par CCM, selon la technique de
l'identification avec comparaison à des témoins d'épi-6-doxycline, de métacycline
et d'oxytétracycline représentant les impuretés potentielles issues de la synthèse.
On recherche également: le fluor, après combustion dans l'oxygène, par une
réaction colorée avec l'alizarine-S-chlorure de zirconyle ( limite de 100 ppm) ; le
soufre sous forme de sulfate après combustion dans l'oxygène ( limite de 0,1 %)
et les métaux lourds par la méthode C (calcination en présence de MgSO,) (limite
de 50 ppm). Toutes ces impuretés proviennent de la préparation. Enfin on éva-
lue les valeurs limites pour les solvants de cristallisation : éthanol par CGL
(4,3-6 %) et eau par semimicrodosage selon Karl Fischer (1,4-2,8 %).

Lorsque le produit est destiné à l'usage parentéral, il doit faire l'objet d'un essai
de stérilité et d'une recherche des pyrogènes chez le lapin.