Page 422 - Traité de Chimie Thérapeutique 2 : Médicaments Antibiotiques

412 MÉDICAMENTS ANTIBIOTIQUES

les tissus animaux ; les conditions expérimentales de quelques méthodes sont
détaillées dans le tableau 4.
Tableau 4

COLONNE PHASE MOBILE DETECTEUR
Bondapak phényl Acide Phosphorique 0,05 M - UV
Acétonitrile (3: 1)
Bondapak C,, Acétonitrile 20 9 dans tampon UV à 278 nm
acétate de sodium 0.05 M ( pH 5,3)
Bondapak C, Méthanol • eau UV
Bondapak C,, Actonitrile - tampon phosphate UV à 278 nm
(1: 3)
Bondapak C,, Eau - Méthanol - Acide acétique UV à 280 nm
Micropak CN Hexane - dichlorométhane - méthanol UV à 254 nm
O,, Varian Micropak MC H tampon phosphate (pH 3,5) - UV à 278 nm
(10 m) méthanol - acétonitrile (27 : 9 : 4)
Nucléosil C,(5 m) Eau - Méthanol ( 7 : 3) UV à 278 et
350 nm
Hypersil H CDS Eau - Acétonitrile - tampon acétate UV à 276 nm
5
(80:20:1)
Partisi-10 OS Phosphate monopotassique 50 mM UV à 254 nm
RP.-2 (10 m) Phosphate dipotassique 0,01 M - UV
Méthanol ( 29 : 21)
Colonne à phase inverse C 18 Méthanol - Eau - Acide acétique polarographique
(45: 55 :1) ou alcool isopropylique -
Eau - Acide acétique ( 30 : 70 :1)

• Méthodes colorimétriques
La colorimétrie fonctionnelle du chloramphénicol utilise la présence du groupe
nitré aromatique, du groupement dichloroacétamido ou de l'enchaînement ami-
nopropanediol. De ce fait, de nombreuses méthodes de dosage ont été étudiées,
nous n'en mentionnerons que quelques-unes, à titre d'exemples. La plupart d'entre
elles sont désormais peu utilisées.
a) Réactions dues au groupement nitré
La réaction classique de diazocopulation est applicable au chloramphénicol.
Après réduction du groupe nitré en arylamine primaire, l'action de l'acide
nitreux forme un sel de diazonium, qui est condensé sur une naphtylamine
substituée ou sur un phénol et donne naissance à un azoïque coloré.
Par simple chauffage dans une solution aqueuse concentrée de soude, le chlo-
ramphénicol développe une coloration jaune attribuable à la formation d'un
diazoïque. Par condensation avec l'a-naphtol, il se développe une coloration
bleue qui permet de doser le chloramphénicol à l'échelle du milligramme.
En général, les composés aromatiques mononitrés ne développent pas de colo-
ration par action de l'acétone et d'une solution alcaline. Dans des conditions
particulières, en solution dans le diméthylformamide et en présence
d'hydroxyde de tétraéthylammonium, le chloramphénicol développe une colo-
ration rouge et la spectrophotométrie à 520 nm permet le dosage pour des
prises d'essai voisines de 100 g à 150 g.