Page 423 - Traité de Chimie Thérapeutique 2 : Médicaments Antibiotiques

11. LE CHLORAMPHÉNICOL ET DÉRIVÉS 413

b) Réactions dues au groupement dichloroacétyle
Par son groupement dichloroacétyle, le chloramphénicol fournit une réaction
de Fujiwara positive. A froid, en présence d'une solution pyridinique de m-
dinitrobenzène et d'une solution aqueuse de soude, il apparait une coloration
rose; la lecture à 525 nm permet le dosage à l'échelle de 100 g.
L'acide dichloroacétique et ses dérivés tels le chloramphénicol sont décom-
posés en milieu alcalin.
• Par action de l'hydrazine à chaud, il y a déshalogénation et formation d'acide
glyoxylique, stabilisé sous forme d'hydrazone. Ce dernier est condensé en milieu
acide avec le résorcinol : il y a formation de la lactone de l'acide tétrahydroxy-2,
2', 4,4' diphénylacétique, colorée par la soude en bleu, puis en rouge tandis que
se développe une fluorescence jaune-vert.
• Par action de la soude à chaud, il y a déshalogénation et formation d'acides
glyoxylique puis oxalique. Ce dernier, réduit en milieu acide par le zinc, peut être
dosé par spectrophotométrie après action de la phénylhydrazine et du ferricya-
nure de potassium.
c) Réactions dues à l'enchainement amlnopropanedlol
- Après hydrolyse acide de l'amide dichloroacétique, l'enchainement aminodiol
peut être oxydé par l'ion périodate avec formation de p-nitro-benzaldéhyde
que l'on révèle à chaud par la dinitro-2, 4 phénylhydrazine en milieu alcalin:
obtention d'une coloration rouge-orangé.
- Le produit d'hydrolyse du chloramphénicol, l'amino-2 (nitro-4 phényl)-1
propanediol-1,3 peut être dosé sélectivement en mettant à profit la réactivité
du groupe aminé primaire ; après action de naphtoquinonesulfonate de sodium
à pH = 8, puis d'acide acétique et d'acide ascorbique, on dose par spectro-
photométrie à 440 nm.
d) Réaction due à la fonction amide
La fonction amide de l'antibiotique réagit avec l'hydroxylamine en milieu basi-
que, pour former un acide hydroxamique lequel, par addition de chlorure ferri-
que, donne un complexe coloré en violet.

• Méthode polarographique
La fonction nitrée du chloramphénicol est électroréductible à pH 4 et peut être
dosée par polarographie.

5.3.2. Méthodes volumétriques

Ces méthodes sont très nombreuses ; nous en rapportons quelques unes à titre
d'exemples.
a) Minéralisation du chlore par le zinc en milieu acide ou par chauffage en milieu
alcalin concentré, puis dosage de l'ion chlorure par les méthodes usuelles ( argen-
timétrie ou mercurométrie).