Page 250 - Traité de chimie thérapeutique 6 Médicaments antitumoraux

206 MEDICAMENTINDUISANTDES MODIFICATIONS COVALENTES DE L'ADN

Il demeure cependant établi que l'activité du métozolomide dépende de la formation
de cet ion méthyldiazonium capable de méthyler par réaction de type SN2 des sites
nucléophiles de I'ADN. Au moins 70 % de la méthylation totale a lieu sur N'de la guanine,
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5 % sur 0 de la même base et 9,2 % sur N? de l'adénine.
laméthylation de la guanine sur l'oxygène 6 est une lésion mutagène responsable de
la transition G :C en A :T pouvant induire des coupures des brins d'ADN et de provoquer
l'apoptose dans des lignées de cellules leucémiques.
Les travaux réalisés par HIAose et al. sur des cellules de gliomes humains exprimant
p53 ont montré que cette méthylation en 6 de la guanine produit un désapariement de
celle-ci (avec la thymine), qui conduit à à une réparation de cette anomalie (mismatch
repair : MMR) et à la mort cellulaire. Le témozolomide induit une MMR dont la résultante
ne serait pas l'apoptose mais l'arrêt prolongé en phase G,-M provoquée par p53 et p21
et enfin, sénescence cellulaire ; des cellules déficientes en p53 sont d'ailleurs plus
résistantes au témozolomide. L'arrêt en G,-M mentionné plus haut peut théoriquement
protéger les cellules contre l'effet cytotoxique du TMZ mais, en fait, l'activation de la
MMR induite par le TMZ favorise la formation de Chk 1 et la phosphorylation de cdc25
(substrat de la dk1 kinase) empêchant aussi l'action de la phosphatase de cdc25. Chk 1
provoque la levée du point de contrôle G2 en augmentant le nombre de cellules entrant
prématurément en mitose - et donc qui meurent - qu'elles expriment ou non p53.
Ces résultats montrent l'importance des possibilités de restauration de l'ADN dont le
rôle est essentiel pour limiter les effets de ces principes actifs. Même si les méthylations
en 6 de la guanine restent en faible pourcentage au sein de l'ADN, l'importance sur la
cytotoxicité et la mutagénicité sont grandes.
• L'enzyme OGAT qui transfère de manière stœchiométrique le méthyle à une cys-
téine annule ces modifications mais subit une inactivation irréversible. C'est la raison
pour laquelle une surexpression de cette enzyme de réparation peut intervenir dans les
résistances aux agents alkylants.
Dans les cellules mononucléées du sang périphérique, le témozolomide, comme la
dacarbazine, entraîne une déplétion en OGAT. Un prétraitement à l'aide d'un analogue
de substrat peut pallier les résistances au témozolomide dont l'OGAT est responsable.
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Après la 0 -méthylguanine, c'est surtout la O-benzylguanine qui est utilisée puisque
c'est un meilleur substrat pour l'OGAT; un groupe benzyle étant plus rapidement
déplacé qu'un méthyle dans les réactions bimoléculaires. Effectivement, la O-benzyl-
guanine augmente expérimentalement la sensibilité de cellules leucémiques à l'apoptose
provoquée par le témozolomide, I'0-(4-bromothiényl)méthylguanine améliore les per-
formances contre les xénogreffes de mélanome.
• Les méthylations sur N de la guanine et N? de l'adénine provoquées par le témozo-
lomide peuvent empêcher la réplication de l'ADN tout comme les dépurinations enzy-
matiques ou spontanées vont provoquer des coupures de brins d'ADN. Il n'y a pas cor-
rélation entre la résistance au témozolomide et l'expression des N'-méthylguanine-DNA
et N?-méthyladénine-DNA glycosylases qui coupent les bases méthylées correspondan-
tes et donc ces lésions ne sont pas essentielles à la cytotoxicité du produit.
Cependant, il est possible de potentialiser les effets cytotoxiques de ces produits
méthylés via l'inhibition de la PARP, enzyme activée par le traitement au témozolomide
alors que les coupures de brins d'ADN l'activent ce qui permet l'accès des enzymes de
réparation aux sites endommagés.
Les inhibiteurs de la PARP, tels que le benzamide ou le 3-aminobenzamide, ne produi-
sent pas toujours d'effet proportionnel sur la cytotoxicité du témozolomide, mais l'asso-
ciation de ces composés avec la O-benzylguanine constitue une piste intéressante.