Page 412 - Traité de Chimie Thérapeutique 4 Médicaments en relation avec des systèmes hormonaux

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5. PRINCIPES DE SYNTHÈSE PEPTIDIQUE

6.2. CONTRÔLE ANALYTIQUE
Étant donné la complexité des peptides de synthèse, la caractérisation analytique des
peptides de synthèse doit être particulièrement rigoureuse.
Elle a pour objet de s'assurer de l'homogénéité et de l'identité des produits. Pour
cela, il est fait systématiquement appel :
- aux techniques de chromatographie liquide haute performance (CLHP) en phase
inverse ;
- à la détermination de la composition en acides aminés après hydrolyse acide totale ;
- à la détermination de la masse moléculaire par spectrométrie de masse.
Dans le cas de peptides de grande taille, des techniques empruntées à la chimie
des protéines, telles que la dégradation d'Edman (qui permet de déterminer la
séquence en acides aminés) et des fragmentations par des enzymes protéolytiques
spécifiques sont également utilisées.

7. EXEMPLES DE SYNTHÈSES INDUSTRIELLES

Deux stratégies industrielles de préparation de peptides d'intérêt pharmaceutique
sont illustrées ci-dessous.

7.1. PRÉPARATION DU FACTEUR THYMIQUE SÉRIQUE (FTS)
La stratégie mise au point par les laboratoires CHOAY, représentée à la figure 22, met
en jeu la préparation de deux fragments protégés A (3-6) et B (7-9) par élongation pas
à pas de leur extrémité COOH-terminale vers leur extrémité NH2-terminale. Ceci est
réalisé au moyen d'esters activés (esters de nitrophényle ONP, de pentachlorophényle
OPCP ou de N-hydroxysuccinimide, OSu) ainsi que d'anhydrides mixtes (chlorofor-
miate d'isobutyle). Les deux fragments sont couplés (étape 8) par activation de la gly­
cine 6 évitant ainsi les risques de racémisation puisque cet amino-acide n'est pas chi­
ral. Les deux premiers amino-acides Ala et p-Glu (acide pyroglutamique) sont enfin
couplés successivement au fragment 3-9 ainsi obtenu. Des groupes protecteurs tem­
poraires de type Boc au niveau des fonctions a-NH2 ont été associés à des protec­
tions permanentes de type benzylique. La déprotection finale est réalisée en une seule
étape par hydrogénation catalytique. Une telle stratégie permet de produire environ
60g de peptide brut en 50 à 60 jours de travail. Tous les produits intermédiaires sont
purifiés par cristallisation. La purification du produit final s'effectue en une étape par
chromatographie.
7.2. SYNTHÈSE SUR SUPPORT SOLIDE
D'ANALOGUES DE LA VASOPRESSINE
Une stratégie totalement différente a été employée par les laboratoires Smith, Kline
and French pour la production à grande échelle d'analogues de la vasopressine.
Le matériel utilisé ne diffère pas, dans son principe des synthétiseurs de laboratoire
tels que celui représenté figure 19, seul un changement d'échelle les distingue. En
effet, à la place des réacteurs habituels qui contiennent quelques grammes de résine,
les réacteurs employés de contenance de 1 à 25 litres permettent de travailler avec
100 g à 7 kg de résine.