Page 16 - Бог малын сохор догол өвчнөөс сэргийлэх идэвхгүйжүүлсэн вакцины загвар бэлтгэн сорьсон дүн

Бог малын сохор догол өвчнөөс сэргийлэх идэвхгүйжүүлсэн вакцины загвар 2013
бэлтгэн сорьсон дүн

1. Шингэн тэжээлт орчинд өсгөвөрлөсөн M. agalactiae –н өсгөврөөс 1.5 мл-ийг

цодонд хийж 15000 эрг/мин хурдаар 10 мин центрифугдэв.
2. Шингэн хэсгийг асгаж / соруулж / 100 мкл ПГУ -ын ус хийн цийдмэгжүүлээд,

сэгсрэгч (vortex) дээр зайлав.
3. Дээр нь 1мл Тризол /Trizol/ нэмж зөөлөн сэгсрээд 3 минут тасалгааны хэмд

тавина.

4. Үүний дараа 0.3 мл хлорформ нэмж 15 секунд сэгсрээд 2-3 минут тасалгааны
нөхцөлд тавиад 10000 эрг/мин хурдаар 10 минут центрифугдэв.

5. Дээж нь 3 давхрага үүсгэнэ. Дээд талд РНХ байна. Энэ нь хэрэггүй тул түүнийг
соруулж асгана.

6. Дээр нь 0.3 мл изопропил (isopropyl) (100% ethanol per 1ml) нэмж 20 секунд

сэгсрээд 2-3 минут тавиад 5000 эрг/мин 5 минут центрифугдэв.
7. Шингэнийг (supernatant) соруулж асгаад суусан тунадас (pellet) дээр нь 1 мл 10

Alch 0.1М sodium citrate нэмж сайтар холин 15 минут тасалгаанд тавина. Энэ
хугацаанд байнга сэгсэрнэ. 5000 эрг/мин 5 минут эргүүлнэ.

8. Дахин нэг удаа дээрх шатыг давтана. Тунадас / pellet / дээр 75% ethanol 1.5
мл хийж тасалгаанд 15 минут тавина. Энэ хугацаанд байн байн сэгсэрнэ. 5000

эрг/мин 5 минут эргүүлнэ.

0
9. Шингэнийг соруулж асгаад pellet -ээ сайн хатаана (3-4 мин) термoстатад (37 С)
тавьж болно. Хатаасны дараа 100 мкл ПГУ -ын ус хийнэ

0
ПГУ –д ашиглатал -20 С –д хадгална.

Цэрэндоржийн Батболд 14