Page 17 - Бог малын сохор догол өвчнөөс сэргийлэх идэвхгүйжүүлсэн вакцины загвар бэлтгэн сорьсон дүн

Бог малын сохор догол өвчнөөс сэргийлэх идэвхгүйжүүлсэн вакцины загвар 2013
бэлтгэн сорьсон дүн

ПГУ –ын холимог бэлтгэх

Хоёрдугаар хүснэгт. M. agalactiae -г илрүүлэх ПГУ –ын холимог
ДМАЭМБ –аас 1 дээжний Mульти- 1 дээжний
д/д зөвлөсөн ПГУ эзэлхүүнд д/д флекс ПГУ эзэлхүүнд

1. ПГУ-н буфер 10 мМоль 1. ПГУ-н буфер 10 мМоль
2. MgCL 2 1.5 мМоль 2. MgCL 2 2 мМоль
3. KCL 50 мМоль 3. dNTP 100 мМоль
4. dNTP 1 мМоль праймер Тус бүрээс

4. MA-1, MA-2, 0.1 мкл
CL-1, CL-2

Праймер Тус бүрээс Taq
MAGAUVRC1-L 20 пико-моль 5. полимераза 2.5 нэгж
5. MAGAUVRC1-R
6. Taq полимераза 1.25 м-моль / 6. ПГУ-ын ус Шаардагдах

нэгж хэмжээгээр
7. ПГУ-ын ус Шаардагдах
хэмжээгээр 7. Эх ДНХ 5 мкл
8. Эх ДНХ 1 мкл
Нийт эзэлхүүн 20-50 мкл Нийт эзэлхүүн 20-50 мкл

ПГУ –ын машинд дулаан солилцох үечлэл
1 94 С- 2 мин 1 95 С- 5 мин
0
0
0
0
2 94 С- 0.5 мин 2 94 С- 1 мин
3 50 С- 0.5 мин 35 мөчлөг 3 46 С -1 мин 30 мөчлөг
0
0
0
0
4 72 С- 1 мин 4 72 С- 1 мин
5 72 С- 10 мин 5 72 С- 10 мин
0
0
0
4 С- ∞ хадгалах 4 С- ∞ хадгалах
0
ПГУ –ын дүнг унших

Бид ПГУ –ын дүнд олшруулсан ДНХ –ээс 5 мкл, ачааллагч буферээс 1 мкл
авч холиод 1х ТАЕ буфер бүхий 0.7% -ийн агарозын гельд стандарт ПГУ –ын

бүтээгдэхүүнийг, 3.0% ийн агарозын гельд мультифлекс ПГУ –ын

бүтээгэдхүүнийг тус тус хийж электрофорезын аппаратын 10 вт –д, 25 - 30 минут
гүйлгэв. Хугацаа дуусмагц гелийг этидиум бромидын уусмалд 15 – 20 минут

будаад, нэрмэл усанд 5 минут угаасны дараа хэт ягаан туяаны гэрэлтүүлэгчид

Цэрэндоржийн Батболд 15