Page 143 - Traité de chimie thérapeutique 6 Médicaments antitumoraux

6. OXAZOPHORINES : CYCLOPHOSPHAMIDE ETANALOGUES 99

4. CONTRÔLE
4.1. CYCLOPHOSPHAMIDE
L'hydrate de (RS)-cyclophosphamide est inscrit à la Ph. eur. 4 (2002) et à l'USP 24.
À la Ph. eur., l'identification est assurée par diverses techniques alternatives :
- comparaison du spectre IR (KBr) à celui de la SCR ;
détermination du point de fusion du produit seul (voisin de 51 C), puis mélangé à la
SCR (pas de différence > 2 °C) ;
chromatographie sur couche mince de gel de silice ;
test avec une solution aqueuse de AgNO,. A froid, la solution reste limpide, après
ébullition, il se forme un précipité blanc de AgCI. Ce dernier est soluble dans la solu-
tion aqueuse de NH, et reprécipite avec HNO.
L'essai comporte les vérifications suivantes :
limpidité, coloration (< témoin J6) et pH d'une solution aqueuse à 2%;
- recherche des substances apparentées par CCM : gel de silice G, solvant : acide
formique anhydre : acétone : eau : butanone (2 : 4 : 12: 80), révélation à l'aide de
chlore (KMNO, et HCl) à chaud, puis d'une solution de KI amidonnée, par comparai-
son avec la SCR ;
- recherche des ions Cr sur une solution fraîchement préparée (limite 330 ppm), des
phosphates (limite 100 ppm), des métaux lourds (limite 20 ppm) ;
- détermination de la teneur en eau par semi-microdosage selon Karl Fischer: de 6 à
7%.
Le dosage est réalisé par saponification à l'aide de NaOH à 0,1% dans l'éthylène
glycol et dosage des ions Cr ainsi formés par la méthode de Charpentier-Volhardt. Le
titre doit être compris entre 98 et 102 %.
L'USP 24 utilise pour le dosage la CLHP : une colonne de type L1 (octadécylsilane
greffé sur particules de silice ou de céramique de diamètre compris entre 5 et 10 m),
une solution eau: acétonitrile (70 : 30), la détection en UV à 195 nm et l'éthylparaben
(p-hydroxybenzoate d'éthyle) comme étalon interne. Le titre requis est compris entre 97
et 103 %.

4.2. IFOSFAMIDE
L'ifosfamide est inscrit à la Ph. eur. 4 (2002).
- Identification : par IR (KBr) avec comparaison à la SCR.
- Essai
Sur une solution aqueuse à10%: vérifications de la limpidité et de la coloration (< à
celle de la solution témoin d,), de l'acidité ou de l'alcalinité (rouge de méthyle puis phé-
nolphtaléine), de l'angle de rotation optique (- 0,10° < a < + 0,10°).
Essais-limites : ions Cl (100 ppm), métaux lourds (10 ppm de Pb).
Teneur en eau :<$0,5 % (semi-microdosage).
Recherche des substances apparentées (figure 9) à l'aide de deux techniques.
- A: CCM sur gel de silice avec la phase mobile, eau : MeOH : AcOH : CH,Cl, (10:15:
25 : 50) et révélation par du chlore, puis après élimination de l'excès, traitement à la
tétraméthylbenzidine. Les impuretés qualifiées sont : le phosphate de 3-[(2-chloroé-
thyl)amino]propyle 24, l'anhydride correspondant 29, la 2-chloroéthanamine 25
(cf. 3.5.2. et figure 7) ; le 2-aminoéthanol 28 est une autre impureté détectable.