Page 230 - Traité de chimie thérapeutique 6 Médicaments antitumoraux

186 MEDICAMENTS INDUISANTDES MODIFICATIONS COVALENTES DE L'ADN

4. CONTRÔLE
La dacarbazine est inscrite à l'USP 24.

4.1. IDENTIFICATION
Elle repose sur le spectre IR qui doit concorder avec celui du spectre de référence.
La BP 99 complétait par un spectre UV: vérification de la À. max à 323 nm et de
l'épaulement à 275 nm.

4.2. ESSAI
- Détermination des cendres sulfuriques : < 0,1 %.
- Essai-limite pour les substances apparentées, par CCM gel de silice, butanol : eau :
acide acétique (5:2: 1), révélation en UV ; la teneur en 5-aminoimidazole-4-carboxa-
mide 1 et en 2-azahypoxanthine 3 ne doit pas dépasser 1 % de chacune de ces impu-
retés.
4.3. DOSAGE
Par spectrophotométrie UV, sur des solutions dans un tampon phosphate à pH 7 et dans
HCI0,1 M, d'une part, du produit à tester et, d'autre part, de la SR, aux longueurs d'onde
de 329 et de 323 nm (titre compris entre 97 et 102 %).
La BP 99 utilisait la titrimétrie en milieu anhydre (AcOH) par HCIO, 0,1 M et détermina-
tion potentiométrique de la fin de titrage, le titre devant être compris entre 98,5 et 101 %.
Pour les préparations destinées à l'injection parentérale qui sont constituées d'un
lyophilisat de dacarbazine et des solvants nécessaires, l'USP 24 préconise le dosage de
l'eau (< 1,5 %), la vérification de la solubitité, la coloration de la solution (de jaune pâle
à jaune) et sur la solution destinée à l'injection, les essais suivants :
• Identifications
a) Par CCM: gel de silice et isopropanol: hydroxyde d'ammonium 1 M (3:1) avec
révélation à l'aide de ferricyanure ferrique, la dacarbazine apparaissant en bleu sur le
fond jaune pâle.
b) Caractérisation du mannitol : par oxydation à l'acide periodique en milieu métha-
nolique et coloration à l'acétylacétone.
c) Caractérisation de l'acide citrique : réaction avec l'anhydride acétique et la pyridine.
• Vérification du pH : entre 3 et 4.
• Teneur limite en 2-azahypoxanthine : 1 % qui doit être vérifiée par CLHP : octadé-
cylsilane lié à de la silice poreuse ou à des microparticules de céramique de diamètre
compris entre 3 et 10 m, détection à 323 nm.
Toutes les manipulations doivent naturellement être menées le plus possible à l'abri
des rayonnements actiniques.
4.4. DOSAGES DANS LES LIQUIDES BIOLOGIQUES
Le dosage du DIC a d'abord été pratiqué par voie colorimétrique (Loo et STASSWENDER,
1967): photodécomposition en UV; le diazoique 2 forme un dérivé coloré en présence
de réactif de Bratton et Marshall : N-(1-naphtyl)éthylène diamine. La polarographie a été
aussi utilisée. Plus tard, l'usage de la CLHP en phase inverse avec détection en UV s'est