Page 562 - Traité de Chimie Thérapeutique 4 Médicaments en relation avec des systèmes hormonaux

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Les 19-nor-A-4-3-cétostéroïdes donnent une réaction colorée avec le bleu de tétra­
zolium en présence d'hydroxyde de tétraméthylammonium (formation d'un formazane
rouge-pourpre), correspondant à une oxydation du cycle A avec aromatisation.
3.5. CONTRÔLE

3-5-1. Identification
Elle fait appel, en particulier dans les pharmacopées, au spectre IR et à la CCM par
rapport à une substance de référence, à la vérification du maximum d'absorption UV,
du pouvoir rotatoire et du point de fusion.
La CCM est pratiquée sur silice ou kieselgel avec des solvants variables. La révéla­
tion est réalisée, soit en UV à 254 nm avec des plaques F254, soit en UV à 365 nm
mettant en évidence une fluorescence après pulvérisation de H2SO4 en solution
alcoolique et chauffage à 120 °C-130° C.
Des réactions colorées ou de fluorescence des stéroïdes sont également prati­
cables mais ne sont pas spécifiques.
Dans le cas des esters, la partie acide est caractérisée après saponification (ex :
groupe acétyle par la réaction de la Ph. Fr. avec le nitrate de lanthane et l'iode,
après hydrolyse phosphorique).
3.5.2. Essai
A côté des essais classiques de limpidité, neutralité de la solution, perte à la dessic­
cation et cendres sulfuriques, le pouvoir rotatoire est mesuré et les substances appa­
rentées sont recherchées par CCM dans les conditions de l'identification ou par CLHP
avec détection UV.
Des recherches particulières d'impuretés sont également pratiquées par spectro-
photométrie UV :
- vérification de la valeur de l'absorbance au maximum d'absorption du produit,
- mesure de l'absorbance au maximum d'absorption de certaines impuretés (ex :
étynodiol, USP XXII : X maximum à 236 nm, correspondant aux diènes),
- rapport des absorptions à deux longueurs d'onde caractéristiques d'impuretés et
du produit (ex : acétate de mégestrol, BP 93 : 240 et 287 nm).

3-5.3- Dosage
- Les dérivés 17-éthynyl- sont généralement dosés par argento-protométrie en
appliquant la réaction avec AgNO3 dans le THF et en dosant par l'hydroxyde de
sodium l'acidité libérée :
R-C = CH + 7 AgNO3 + H2O -> R-C = C-Ag, 6 AgNO3 + NO3~ + H3O +
- Une méthode générale applicable aux énones est la spectrophotométrie UV au
maximum d'absorption, en parallèle avec une substance de référence et comparaison
des absorbances.
Remarque : Les substances suivantes font l'objet de monographies dans des pharma­
copées : chlormadinone {Ph. Fr. 10° ed.), acétate d'étynodiol et caproate de 17-
hydroxyprogestérone (SP 93, USP XXII), lynestrénol (BP 93), acétate de médroxypro­
gestérone (Ph. europ. 2° ed., USP XXII), mégestrol (BP 93), acétate de noréthistérone
(Ph. europ. 2° ed.), norétynodrel (USP XXII).