Page 32 - KIMIA ORGANIK- LIPID DH 2021 terbaru (gabungan pdf)_Neat

terdapat kolesterol, maka lapisan kolesterol di bagian atas menjadi berwarna

merah dan asam sulfat terlihat berubah menjadi kuning dengan warna
fluoresens hijau.

6. Uji Lieberman Buchard

Uji Lieberman Buchard merupakan uji untuk identifikasi kolesterol.

Prinsip uji ini adalah mengidentifikasi adanya kolesterol dengan

penambahan asam sulfat ke dalam campuran. Sebanyak 10 tetes asam asetat
dilarutkan ke dalam larutan kolesterol dan kloroform (dari percobaan

Salkowski). Setelah itu, asam sulfat pekat ditambahkan. Tabung dikocok

perlahan dan dibiarkan beberapa menit. Mekanisme yang terjadi dalam uji

ini adalah ketika asam sulfat ditambahkan ke dalam campuran yang berisi
kolesterol, maka molekul air berpindah dari gugus C3 kolesterol, kolesterol

kemudian teroksidasi membentuk 3,5-kolestadiena. Produk ini dikonversi

menjadi polimer yang mengandung kromofor yang menghasilkan warna

hijau. Warna hijau ini menandakan hasil yang positif. Reaksi positif uji ini

ditandai dengan adanya perubahan warna dari terbentuknya warna pink
kemudian menjadi biru-ungu dan akhirnya menjadi hijau tua.

b) Uji Kuantitatif Lipid

1. Uji Bilangan Iodin

Lipid mengandung bermacam-macam asam lemak tak jenuh yang
bereaksi dengan ion. Jumlah iod yang diabsorpsi menetukan jumlah

ketidakjenuhan dalam lipid. Jadi angka iod didefinisikan sebagai banyaknya

gram iod diabsorpsi oleh 100 gram lipid. Dua metode yang umumnya

dipakai yaitu metode Hanus yang memakai iodin bromida sebagai carrier

dan metode Wijs yang memakai iodin klorida. Namun metode yang
digunakan pada percobaan ini adalah metode iodin Hanus. Sebanyak 0,25

gram lipid padat ditambahkan 10 mL kloroform. Lipid padat ini tidak larut

dalam kloroform karena lipid yang digunakan adalah lipid padat, bukan

lipid yang sudah dicairkan dengan proses pemanasan (Winarno, 2004).

Lipid 25